1963年，出演首部电影《宝莲灯》反串男角饰演刘彦昌；1964年主演文艺片《情人石》获得国际独立制片人协会“金武士奖” 。1966年，主演胡金铨执导的中国新派武侠电影开山之作《大醉侠》 。1971年郑佩佩结婚宣告退出娱乐圈。
1992年复出影坛；同年参演周星驰电影《唐伯虎点秋香》饰演“华夫人” 。2001年凭借李安的《卧虎藏龙》 “碧眼狐狸”一角，获得香港电影金像奖最佳女配角奖项以及角逐奥斯卡金像奖 。2013年，在电视剧《精忠岳飞》里饰演“岳母” 。
2014年，与本-维肖主演英国电影《轻轻摇晃》，获得圣丹斯电影节“世界电影评委会剧情片摄影奖” 。4月，参加由“湖南卫视”首档明星姐弟自助远行真人秀《碧生源花儿与少年》 。2016年参演电视剧《幻城》。
